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标题: sos~~紧急求助~~关于分子生物学的问题~~ [打印本页]

作者: 紫雾幻影 时间: 08-1-13 22:07
标题: sos~~紧急求助~~关于分子生物学的问题~~
1,如何判断获得的某一真核生物CDNA序列是否为全长序列?

2,根据你掌握的知识,试述利用基因工程技术调控基因表达的主要方法

我自己的大概思路是：
1 扣除杂交还有 CDNA的特性去判断,如与起始密码子和终止密码子,以及是否含有PLOYA什么的
2 RNA干扰等

求各位兄弟姐妹帮忙解决一下~考研在即，紫雾再次谢过大家了~

作者: 紫雾幻影 时间: 08-1-14 12:48
[s:10] 没人会吗？？

作者: gubenguo 时间: 08-1-14 13:07
cDNA序列的特点是3‘有polyA，5‘有ATG起始密码子。而在ＡＴＧ的上游一般还有一些序列．
有了ｃＤＮＡ在基因组水平上去找对应的ＤＮＡ序列．比对序列之间的内含子，找到减切位点．
如果是已知的基因来克隆的　ｃＤＮＡ，可以根据基因的虚列来进行基因的预测，比对你得到的ｃＤＮＡ序列．
同时还可以利用表达的蛋白序列进行比对．因为有时候基因的可变减切让预测不准，就只能通过ｃＤＮＡ的测序和蛋白的真实序列进行检测了．

调空基因表达主要是上调ｕｐ和下调ｄｏｗｎ．上调的方法根据具体的生物体不同，思路无非是增加基因的拷贝，增强转录和翻译的水平．根据具体基因的调控方式．一般的方法是使用强启动子，从而大量表达．下调可以分为两种，一种是ｋｎｏｃｋｏｕｔ，就是通过同源重组的方式把基因给去掉．但是在植物中基因重组的方式是不清楚的，所以ｋｎｏｃｋｏｕｔ多见于微生物．另一重方法是通过同源重组，在原来的基因中插入一段序列，造成基因功能的丧失．但是，有些基因功能丧失会导致胚胎期死亡，或苗期死亡的现象．动物中存在Ｃｒｅ／ｌｏｘＰ的方式，通过药物注射在某一器官中，导致特定基因的失活和功能恢复．ＲＮＡｉ是现在比较流行的方式，优点在于，虽然导致某个基因的表达水平下调，但是仍有部分功能的产生，所以可以在一定程度上回避胚胎死亡．

作者: kkzhu 时间: 08-1-14 14:46
按题目大小,酌情回答,但知识点一定要有,思路一定要清晰,大熊的回答很有代表性.

作者: 雨逸 时间: 08-1-14 15:54
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作者: 紫雾幻影 时间: 08-1-15 15:34
[s:9] 谢谢诸位了

作者: yudengke1985 时间: 08-1-15 21:37
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作者: xuhzi 时间: 08-1-16 17:04
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作者: xuhzi 时间: 08-1-16 17:20
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作者: 花仙子2008 时间: 08-1-16 21:28
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作者: 花仙子2008 时间: 08-1-16 21:31
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作者: gubenguo 时间: 08-1-17 12:37
大熊觉得９楼的答案有些偏题．
因为题目问的是基因工程技术在表达调空方面的作用．
所以了，主要就是基因的敲除，转入，启动子的调空，microRNA的应用了．
至于在转录后水平的调控，这些多为生化方式．不是传统的基因工程方式．或者为基因工程的间接方式．至于直接的基因工程，更多停留在基因组水平上和转录组水平上的．
而生化水平的方式，应该不算在本题的答案中．

[ 本帖最后由 gubenguo 于 2008-1-17 12:42 编辑 ]

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